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Index & Contents

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[목차]

 

◇실험의 목적◇

◇실험방법◇

◇실험의 원리◇

◇결과 및 토의◇

◇참고◇

 

 

 

◇실험의 원리◇

형질전환(TRANSFORMATION)

형질전환이란 수용세포에 노출된 DNA가 흡수, 통합, 발현되는 과정을 나타내며 몇몇의 박테리아 사이에서 자연적으로 일어나는 현상이다 (예로 Stretococcus와 Bacillus). 대장균을 포함한 다른 종은 외부DNA를 흡수할 능력이 없다. 이러한 한계점을 극복하기 위해서 수용세포로 DNA를 삽입하기 위한 인공적인 방법이 고안되었고 수많은 실험생물에 적용되었다. 움직이게 할 수 있는 DNA의 2번째 방법인 형질전환은 1928년 Fred Griffith에 의해 발견되었다. 형질전환은 유전자 형태에서 수용성 Chromosome의 분자 중간물과 합성된 물질인 드러난 DNA분자나 단편에서 이루어진다. 자연적인 DNA형질전환은 박테리아를 줌으로써 온다. 이 과정은 무한적이며 유전자의 어떤 부분도 박테리아 사이에서 형질전환 될 것이다. 박테리아가 섞이면 그들은 주위환경의 대부분의 DNA를 풀어놓는다. 이 단편들은 아마도 비교적 크고 여러 유전자를 내포하고 있다. 만약 이 단편이 반응성이 있는 세포와 접촉하면 DNA를 끌어들여 형질전환을 할 수도 있다.

비교적 DNA의 고농축은 정상적으로 자연 속에 제공되는 보다 높은 형질전환의 횟수 증가로 이용된다. 직선의 DNA조각들은 형질전환으로 사용할 때 E. coli는 대개 형질전환 하는 조각을 보호하기 위해 exonuclease활성을 만든다. 플라스미드는 직선 조각으로 쉽게 퇴화할 수 없기 때문에 숙주 안에서 복제될 수 있으며 플라스미드 DNA에서 박테리아로 형질전환하기 훨씬 쉬워진다. 이것은 박테리아 세포로 DNA을 재조합 하는 일반적인 방법이다. 어떤 원천으로부터 DNA는 형질전환하기 전에 플라스미드 DNA가 재접합 함으로써 안으로 끼워 넣을 수 있다.

VECTOR

VECTOR란 DNA의 이동을 담당하여 원하는 염색체를 실어서 보내서 DNA를 다른 세포에서 복제될 수 있도록 하는 유전 요소를 말한다. 따라서 VECTOR는 복제가 되어야 하고 유전자이송을 담당하므로 복제가 되어야하고 유전자를 넣을 수 있어야 한다.

VECTOR의 기능

1) 세포 내에서의 자가복제(self-replication)기능

Vector로 쓰는 DNA들은 세포 내 에서 자가복제를 한다. 박테리아 세포 내에는 박테리 아가 고유하게 가지고 있는 chromosomal DNA가 있다. 한 세포당 하나밖에 있을 수 없 다. 그런데 ve…(생략)

 

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